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将嗜热芽孢杆菌纸片用无菌镊子放人密封试管中。化学指示卡和留点温度计放人敞口的试管中。上两种试管各准备5—10份。分别放置在压力蒸汽器蒸汽口处、底部排气口处及底部水口处或上下左右中间5处。如压力蒸汽器为二层，则需放10处。留点温度计标化合格后可用于验证试验。检测前，需将温度计的水银柱甩至40℃以下。每次监测后留点温度计的温差应在1℃之间，则说明压力蒸汽器内的温度分布是均匀的。菌片应在严格无菌操作条件下放人后的溴甲酚紫胨水培养基内。56—60℃培养24-48小时，观察颜色变化。如培养基变为黄色，说明菌片中的嗜热芽孢杆菌尚未完全灭活，细菌仍可在培养基中生长，分解葡萄糖产酸变为黄色。如培养基颜色不变化仍为紫色，则说明芽孢菌已灭活。同时要用未经的纸片放人培养基内作为阳性对照，不加纸片的空白培养基作为阴性对照。化学指示卡上的指示色块，在压力蒸汽器时，由淡黄色变为黑色。随着颜色变化的深浅，并与对照色相比，可判断效果是否达到要求。化学指示卡应在干燥处保存。遇潮会变色，影响效果的观测。压力蒸汽器必须使蒸汽顺利进入器内，与物品接触，并将原有的冷空气排出方可达到的效果。要进行空载热分布和满载热穿透力验证(满载时不超过总体积的2／3)。二种验证各重复三次，共做六次表。5个点六次试验表明温度均在121 ℃，化学指示卡变黑；程度与对照色一致；培养基均未改变颜色，说明压力蒸汽器效果合格.

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